登革热病毒PPT素材

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登革热病毒的分子诊断方法
TaqMan MGB 实时荧光 RT-PCR快速检测法
登革热简介
登革热，又名骨痛热，是登革热病毒引起、依蚊传播的一种急性传染病。
本病于1779年在埃及开罗、印度尼西亚雅加达及美国费城发现，并据症状命名为关节热和骨折热。1869年由英国伦敦皇家内科学会命名为登革热。
登革热症状
1、发热
2、全身毒血症状
3、皮疹
4、出血
5、淋巴结肿大
登革热的特点
特点：
1、地方性
2、季节性
3、突然性
4、传播迅速，发病率高，病死率低，疫情常由一地向四周蔓延。
登革热的历史
1779年于开罗发生，于巴达维亚（今雅加达）发生
1873年于台湾澎湖县发生
1987-1990南台湾大爆发
1978年5月2日广东佛山石湾镇发现首例病人。
1999年夏季福州市近郊发生登革热流行
2004年福州市台江、连江、闽侯发生局部流行
2001-2006年广东省共报告登革热本地病例2 897例。
登革热的分布现状
全球每年约有五千万宗登革热个案，常见于热带和亚热带地域。　
登革热病毒
登革病毒基因组结构
传播登革病毒的虫媒
埃及伊蚊（Ae.aegypti)
分子诊断方法
1、TaqMan MGB 实时荧光RT-PCR法
2、核酸杂交技术
3、RT-NEST-PCR
4、多重PCR
TaqMan MGB 实时荧光RT-PCR法
目前最主要采用的对登革热病毒的快速检测方法。
该方法在2009年成为中国出入境检验检疫行业标准。(SN/T 2301-2009)
技术背景
是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术。
于1996年由美国Applied biosystems公司推出，在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过Ct值和标准曲线对样品中的DNA(orcDNA)的起始浓度进行定量的方法。
是目前确定样品中DNA(或cDNA)拷贝数最敏感、最准确的方法。
引物和探针
FAM：荧光报告基团
MGB：荧光淬灭基团
技术原理
技术原理
技术优点
1、特异性更强
2、能有效解决PCR污染问题
3、自动化程度高
4、可实现荧光信号的积累与PCR产物形成完全同步，可以实时监控RT-PCR过程。
应用领域
目前该技术主要应用在检测登革热病毒、口蹄疫病毒、马秋波病毒、禽呼肠孤病毒等方面。
展望
1、多重RT-PCR的改进
2、RT-NEST-PCR的改进
3、探针的改进和新探针的发现