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简介
这是真菌ppt，包括了真菌的生物学性状，真菌的致病性，抗真菌的感染免疫，真菌感染的实验室诊断，真菌感染的防治原则，水产动物常见致病真菌介绍，真菌的特征，真菌的形态和结构，真菌的生长，真菌的抗抗力，真菌的分类等内容，欢迎点击下载。
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第三章 真菌学第一节 真菌的生物学性状第二节 真菌的致病性第三节 抗真菌的感染免疫第四节 真菌感染的实验室诊断第五节 真菌感染的防治原则第六节 水产动物常见致病真菌介绍第一节 真菌的生物学性状 1 真菌的特征 2 真菌的形态和结构 3 真菌的生长 4 真菌的抗抗力 5 真菌的分类 1、真菌（Fungi）的特征细胞壁：不含肽聚糖，含有壳多糖（chintin，又名几丁质）和葡聚糖；植物的细胞壁主要是纤维素；具有完整的细胞结构：有核膜和核仁，有DNA和组蛋白组成的线状染色体；胞浆内有内质网、高尔基体和线粒体；营养方式：异养型，以腐生、寄生、共生或超寄生方式吸收养料；动物一般是先摄取，再消化，称为消化型生物；而真菌却释放多种水解酶至体外，先把底物降解为小分子，然后再把它们吸收到体内，称为吸收型生物。形态：少数单细胞，多为分支或不分支的丝状体；繁殖：能进行有性和（或）无性繁殖，产生孢子；产生的孢子大多数无鞭毛；当有鞭毛时也无鞭葺毛；是生物界中独立的一大类群生物——真菌界（Kingdom Fungi)。 2、真菌的形态与结构 2.1 形态酵母（yeast）：呈圆形或卵圆形，直径约5-8 µm。霉菌（mold）：由菌丝和孢子组成，故又称为丝状菌（filamentous fungus）。二相性真菌（dimorphic fungus）：有些真菌可因环境条件改变而发生丝状菌或酵母两种形态的互变，称为。如组织胞浆菌、皮炎芽生菌等，它们在普通培养基上环境温度培养时一般呈丝状菌形态，在体内或液体中生长时则常常呈酵母状态。 2.2 菌丝大多数霉菌在适宜培养基上生长时能长出中空、细长的微管（横径约2-10 µm），称为菌丝（hypha）。细菌细胞（<2 µm）大菌丝又能长出许多分枝，交织成团，称为菌丝体（mycelium）。根据菌丝功能可分为：营养菌丝体（vegetative mycelium）气生菌丝体（aerial mycelium）生殖菌丝体（reproductive mycelium）。 有隔菌丝（septate hypha）：大部分菌丝间隔一定空间距离有横隔，称为隔膜（septum），隔膜中有孔，可允许胞浆通过。隔膜将一条菌丝分隔成数个细胞，横隔之间为一个细胞，可含有一至数个核。有隔膜 的菌丝称为有隔菌丝。如皮肤癣菌、曲霉等。无隔菌丝（nonsepate hypha）有些真菌菌丝中无横隔，一条菌丝即为一个细胞，其中可含有多个细胞核，无隔膜的菌丝，称为无隔菌丝。如毛霉和根霉等。菌丝形态：螺旋状、球拍状、结节状、鹿角状等。 2.3 孢子（spore）真菌的繁殖细胞，一条菌丝上可长出多个孢子，在环境条件适宜时，孢子又可伸出芽管，发育成菌丝体。真菌孢子易于传播，对不利环境的抵抗力强，因此，孢子大大增强了真菌的生存能力。真菌孢子：有性孢子和无性孢子有性孢子是指真菌通过同一菌体或不同菌体上两个细胞融合，并经减数分裂而形成的孢子，如接合孢子（zygospore），子囊孢子（ascospore）和担子孢子（basidiospore）。接合孢子是一种体积大、胞壁较厚的孢子。子囊孢子在一种称为子囊的结构内形成。担子孢子子通常在一种称为孢子台的基座顶端形成。 无性孢子：不发生细胞间融合，它们一般由真菌菌丝通过有丝分裂方式产生，因此在遗传形状上与其前代完全相同。病原性真菌大多形成无性孢子，无性孢子的形状、颜色和排列有助于真菌的鉴别。常见的有分生孢子（conidium）由菌丝末端细胞分裂形成，也可在菌丝侧面出芽形成，它又可分为体积较大，由多个细胞组成的大分生孢子和体积小，只含有一个细胞的小分生孢子。孢子囊孢子（sporangiospore）菌丝末端膨大形成孢子囊，囊内细胞经有丝分裂产生许多孢子子，孢子成熟则破囊而出。 芽生孢子（blastospore）由菌丝体细胞出芽生成，常见于单细胞真菌。一般芽生孢子长到一定大小即与母体脱离，若不脱防则形成假菌丝，如假丝酵母。厚膜孢子（chlamydospore）可由菌丝细胞分化形成。在不利环境下菌丝细胞内胞浆浓缩，胞壁增厚，抵抗力增强。当环境有利时，厚膜孢子又可出芽繁殖，如假丝酵母。关节孢子（arhtrospore）在陈旧的培养物中，菌丝细胞壁变厚，形成长方形的节段，呈链状排列，如球孢子菌。 孢子从母体真菌释放可具有主动和被动两种方式。在风和水等外力作用下，使孢子从母体脱离的方式称为被动释放方式。菌丝的某些部位变得脆弱，内部压力却明显增加，最终导致孢子的释放，称为主动释放方式。真菌细胞壁和细胞膜的结构特点在医学上具有重要意义。真菌细胞壁主要成分为几丁质和葡聚糖，因此对作用于葡聚糖的抗菌菌药卡泊芬净（caspofungin）敏感。另外，真菌细胞膜中主要含麦角固醇（ergosterol），这不同于人类细胞膜中的胆固醇，因此，它们对两性霉素B和某些唑类药物如氟康唑、酮康唑等敏感。 3、真菌的生长真菌的营养方式主要有3种：腐生方式：利用死的动、植物和微生物残体生存；寄生方式：寄生在动、植物的活组织内，同时对被寄生物产生不利的影响；共生方式：寄生在动、植物的活组织内，同时对被寄生物产生有益的影响。大多数真菌主要以腐生方式生长，但许多在医学上有重要意义的真菌均为寄生菌，如白假丝酵母、新生隐球菌等均为人体条件致病菌。 大多数真菌是需氧菌，少数兼性厌氧菌。另有在污水和污物的处理器中发现一些厌氧真菌。真菌对营养要求不高，在一般培养基上均能生长。实验室常用沙保（Sabouraud）培养基。其主要含有蛋白胨、葡萄糖和琼脂。有些病原性真菌如白假丝酵母、新生隐球菌等需要先用血琼脂平板培养，待生长后移种沙保培养基，并做玻片小培养，观察其结构。真菌的繁殖能力强，但生长速度比细菌慢，常需1-4周才能形成菌落。 4、真菌的抵抗力真菌的菌丝和孢子均不耐热，一般于60-70℃ 1h即被杀死。对干燥、紫外线和多种化学消毒剂耐受性较强，但对于1%-3%苯酚溶液、2.5%碘酒、2%甲紫和10%甲醛溶液则较敏感。真菌对常用的抗生素如青霉素、链霉素及磺胺类药物不敏感，但对于制霉菌素、两性霉素B、酮康唑等对多种真菌有抑制作用。 5 真菌的分类 Ainsworth and Bisby‘s Dictionary of the Fungi <<安·贝氏真菌词典>> 1983年第七版，分类主要依据营养方式、胞壁成分和形态特点真菌界（菌物界） （Mycetalia）（2门）粘菌门（Myxomycota）真菌门（Eumycota）真菌门（Eumycota）（4亚门、18纲、66目、244科）鞭毛菌亚门（Mastigomycotina）接合菌亚门（zygomycotina）子囊菌亚门（Ascomycotina）担子菌亚门（Basidiomycotina）半知菌亚门（Deuteromycotina） 1995年出版了第八版，2001年出版第九版。真核生物域（Domain Eukaryota）（3界）原生动物界（Kingdom Protozoa）假菌界（Kingdom Chromista）真菌界（Fungi）。假菌界（3门）丝壶菌门（Hyphochitriomycota）网粘菌门（Labyrinthulomycota）卵菌门（Oomycota）真菌界（4门和1类）子囊菌门（Ascomycota）担子菌门（Basidiomycota）接合菌门（Zygomycota）壶菌门（Chytridiomycota）无性型真菌类（Anamorphic fungi） 课外阅读文献 Kirk PM， Cannon PF， David JC， et al. Ainsworth and Bisby’s Dictionary of the Fungi. 9 th ed. Wallingford: CAB International， 2001. Hawksworth DL， Kirk PM， Sutton BC et al. Ainsworth and Bisby’s Dictionary of the Fungi. 8 th ed. Cambridge: CAB international，1995. http://www.doctorfungus.org 廖万清 吴绍熙 病原真菌生物学研究与应用 北京：化学工业出版社 2006.6 Brands， S.J. (comp.) 1989-2007. The Taxonomicon. Universal Taxonomic Services， Amsterdam， The Netherlands. [http://taxonomicon.taxonomy.nl/] 第二节 真菌的致病性真菌的致病力较弱，但能通过多种途径、多种机制使机体患病。由真菌引起的疾病统称为真菌病（mycosis）。真菌产生的一些毒素进入机体还可导致全身或某些脏器的中毒症状，有的甚至可以致癌。此外，真菌感染还可能引起各类超敏反应。 1、致病性真菌感染主要是外源性侵袭机体而致病，包括皮肤、皮下组织真菌感染和全身或深部真菌感染。浅部真菌感染如皮肤癣菌等有嗜角质性，能产生角蛋白酶和脂酶分解角质和细胞脂质，并在局部大量繁殖后通过机械刺激和代谢产物的作用，引起局部炎症和病变。二相性真菌如荚膜组织胞浆菌、皮炎芽生菌等进入机体后转换成酵母型，它们在巨噬细胞中不被杀灭而繁殖扩散，从而引起慢性组织肉芽肿和组织溃疡坏死。 2、条件致病性真菌感染该感染主要是一些内源性真菌引起，如假丝酵母、新生隐球菌、曲霉、毛霉等。感染多发在机体免疫力降低时，如长期应用广谱抗生素、皮质激素、放化疗患者，肿瘤、糖尿病、艾滋病、免疫缺陷患者等，如白假丝酵母属于人体的正常菌群，但抗生素使用不当时可大量生长引起疾病。 3、真菌中毒症某些真菌污染作物、粮食、饲料和餐品后，可产生真菌毒素（myxotoxins），动物和人摄入后可引起急性或慢性中毒，称为真菌中毒症（mycotoxicosis）。真菌中毒和一般细菌性或病毒性感染有所不同，它是在粮食和食物中产生毒素，因此受环境条件及饮食习惯等因素的影响，发病有地区性和季节性，但没有传染性。 不同真菌毒素作用的靶组织各异：杂色曲霉毒素主要为肝脏，赭曲霉毒素主要为肾脏，展青霉毒素主要为神经系统。黄曲霉毒素对肝、脑、肾均有明显毒性作用。 4、真菌毒素与肿瘤某些动物 和肿瘤与真菌毒素有关，如赭曲霉毒素（ohratoxin）可致小鼠肾癌，镰刀菌T-2毒素可诱发大鼠胃癌、胰腺癌、垂体和脑肿瘤，展青霉不经皮下注射可引起大鼠肉瘤等。在所有真菌毒素中对环境污染最严重，对人畜危害最大的是黄曲霉素（aflatoxin，AF），它主要由黄曲霉、寄生曲霉等少数曲霉产生，以污染玉米、花生、坚果等农作物及其制品为主。 AF是已知致癌化学物质中毒性最强的一种。能诱导p53抑癌基因突变，导致p53蛋白缺失，使肝细胞生长失控，引发肝癌。此外它也能引起肾、胃、支气管、腺体和皮下组织的癌肿。 5、真菌超敏反应性疾病真菌孢子常散布于空气中，敏感患者吸入或食入时，可引起各种类型超敏反应性疾病，如荨麻疹、变态反应性皮炎、鼻炎、哮喘等。临床上常见的“皮真菌疹（dermatophytids）”就是一种真菌抗原刺激机体产生的超敏反应。第三节 抗真菌感染免疫机体的抗真菌感染免疫同其他抗原微生物感染一样，也包括天然免疫和获得性免疫，两者互相补充，共同配合，缺一不可。 1、天然免疫皮肤黏膜屏障中性粒细胞具有吞噬和杀灭真菌的作用。巨噬细胞在抗真菌感染中也有一定作用，但不如中性粒细胞。 NK细胞真菌组分是补体替代途径的强激活剂，但真菌能抵抗补体攻膜复合物的杀伤。补体活化产生的C3a、C5a，可招引炎性细胞至感染部位。 2、获得性免疫真菌感染可诱导机体产生特异性细胞免疫和体液免疫，其中又以细胞免疫为主。特异性抗体可阻止真菌与宿主细胞或组织的黏附，并提高吞噬细胞对真菌的吞噬率。特异性细胞免疫中CD4+ T细胞产生并释放IFN-γ和IL-2等细胞因子，激活巨噬细胞、NK细胞和CTL等，参与真菌的杀灭。 AIDS、肿瘤患者和长期使用免疫抑制剂者的细胞免疫功能低下，故易受播散性真菌感染。 第四节 真菌感染的实验室诊断 1、标本的采集应在用药前采集标本，浅部感染真菌的检查可采用70%乙醇溶液棉球擦拭局部后取皮屑、毛发、指（趾）甲屑等标本。深部感染真菌的检查可根据病情取血液、脑脊液、淋巴结穿刺液等标本，液体标本可用离心方法富集待检菌，取材时注意无菌操作，及时送检。 2、直接镜检取标本置于载玻片上，加1滴浮载液（生理盐水、KOH溶液、墨汗、棉蓝等），盖上盖玻片，放在酒精灯上微微加热，不使沸腾，然后轻压玻片，再用吸纸吸去周围的溢液，即可在显微镜下进行观察，先在低倍镜下观察有无真菌菌丝或孢子，再用高倍镜观察菌丝或孢子的形态及特征等。 3、真菌分离培养和鉴定将标本先经70%乙醇溶液或2%苯酚溶液浸泡2-3min以杀死杂菌，用无菌盐水洗净后接种于含放线菌酮（抑制腐生真菌生长）和氯霉素（抑制细菌生长）的沙保培养基（隐球菌对这两种药物敏感，应避免使用）。于25-28℃培养数日至数周，然后观察菌落特征。 4、免疫学诊断 5、分子生物学诊断法 6、毒素检测第五节 真菌感染的防治原则真菌感染目前尚缺乏特异性预防方法。注意卫生、避免与患者及污染的物品直接接触。抗真菌药物 针对细胞膜麦角固醇的药物多烯类药物两性霉素B和制霉菌素，它们通过与麦角固醇结合干扰其代谢，增加胞膜通透性而导致真菌死亡；唑类药物较多如酮康唑、克霉唑、咪康唑、氟康唑、伊曲康唑等，它们都作用于真菌依赖细胞色素P450的14a-固醇去甲基酶，抑制麦角固醇的生物合成。 丙烯胺类药物如特比萘芬，它通过特异性地抑制角鲨烯环氧化酶的活性来减少麦角固醇的合成。抑制细胞壁结构尼克霉素，它通过竞争性抑制真菌细胞壁的上几丁质合成酶I、II的活性而破坏真菌细胞壁；卡泊芬净，它对真菌1，3-ß-葡聚糖有明显抑制作用。干扰真菌DNA和RNA合成有核苷类药物如5-氟胞嘧啶等。 目前抗真菌药不理想抗菌谱较窄、对某些组织的渗透力较弱、副作用大等。一些新的有潜力的抗真菌药物正在研发中，并已有多个广谱、高效、低毒的新药进入了临床试验。此外，有效的抗真菌中草药有待于开发。抗真菌药物体外药敏试验 稀释法、扩散法和E-试验方法 赵俊英 王毓新 张文娟 真菌病诊断与治疗 北京：人民出版社，2007.3 第六节 水产动物常见致病真菌介绍 一般认为，对人和动植物有致病性的真菌称为病原真菌。危害水产动物的真菌主要有水霉、棉霉、杀鱼丝囊霉、鳃霉、鱼醉霉、镰刀菌以及链壶菌等。水产动物病原真菌危害较大，危害对象可以是多种水产动物的幼体和成体，也可以危害其卵。传染来源既有外源性也有内源性。其发生与否与鱼体的健康状况和温度等环境因素密切相关，由于杀灭真菌的药物对机体有一定的毒副作用，真菌的抗体多数无抗感染作用，目前水产动物真菌病尚无十分有效的治疗方法，主要是进行早期预防和治疗。 人和大多数动物的真菌病的感染形式多样，包括有真正致病性真菌感染、条件致病性真菌感染、真菌过敏、真菌中毒和真菌毒素致癌等。真正致病性真菌感染主要是一些外源性真菌感染，引起的疾病有各种皮肤癣、皮下和全身性真菌感染。条件致病性真菌感染主要是由一些内源性真菌引起的，这些真菌的致病性不强，常见于各种原因使机体抵抗力降低或菌群失调时发生，如念珠菌、曲霉菌和毛霉菌引起的疾病。变态反应中有些是真菌引起的，如链互隔菌、着色真菌、曲霉菌、青霉菌和镰刀菌等可污染空气环境，引起荨麻疹、过敏性皮炎、哮喘、过敏性鼻炎等。真菌中毒是人和动物食用了某些真菌及其产生的毒素污染的食物和饲料而发生的疾病。 真菌毒素危害很大，毒性作用偏重于某些器官，如黄曲霉毒素、岛青霉素等可引起肝损害，这类毒素为肝脏毒；桔青霉素可引起急性或慢性肾病变，称为肾脏毒；黄绿青霉素可造成大脑和中枢神经系纪的损害，称为神经毒；镰刀菌毒素主要损害造血系统，称为造血组织毒等。真菌毒素致癌主要见于黄曲霉毒素。水产动物真菌病主要有三种类型，一种是体表受伤后真菌在受损部位寄生，称为肤霉病。第二种是感染的真菌进入机体使内脏器官产生病变，称为内脏真菌病或全身真菌病。第三种是产毒性真菌污染饲料，造成水产动物中毒，称为中毒性真菌病。 1、水霉病 Saprolegniasis Oomycota 有性繁殖：卵配，有藏卵器和雄器 reproduce sexually by oogonia eggs 无性繁殖：游动孢子囊和游动孢子reproduce asexually by zoospores，which are motile and can swim quite rapidly. Commonly require water for reproduction 菌丝：无隔菌丝 hyphae have few or no cross-walls (septa) An easy way to see oomycetes is to heat a few sesame seeds until they "pop" and then float three or four on the surface of some pond water in a dish. After a few days the oomycetes with form a thick white growth around the seeds. If you watch there carefully you may be able to observe the release of zoospores. Water molds （水霉）were once thought to be fungi Filamentous growth Feed on decaying matter like fungi Different from fungi Cell wall a mix of cellulosic（纤维质） compounds and glycan（多聚糖）（Fungi: chitin） The nuclei within the filaments are diploid （Fungi: Haploid） The ultrastructure， biochemistry， molecular sequences of these organisms indicate that they belong with the Chromista（假菌） The free-swimming spores which are produced bear two dissimilar flagella， one with mastigonemes（葺鞭葺毛） Presence of the chemical mycolaminarin （粘昆布多糖），an energy storage molecule similar to those found in kelp（海藻）and diatoms （硅藻） 1.2生长特性氧气 氧充足时，菌丝细长，生长茂盛，形成动孢子囊的时间要长些。水中杂质较多，或数个菌落靠在一起的情况下，其菌丝细短，不易形成动孢子囊。水深 如果使死鱼上的水霉置水下10cm-15cm深处，菌丝则细长，形成的动孢子囊细小；使死鱼上的水霉靠近水面，其菌丝变得粗壮，形成的动孢子囊大而多，且易发生有性生殖。温度 10℃～32℃都能生长，但15℃～20℃时生长最好，4℃～7℃时生长缓慢，4℃以下停止生长，-2℃～0℃处理3天菌丝萎缩，动孢子囊和厚垣孢子冻裂瓦解。在水温超过18℃时，鳗鱼的水霉病中止流行。 pH 最适生长pH7.2～7.4，pH6.4或pH8.0时可以生长，但较缓慢，pH4.8～`5.6时生长受到完全抑制，强酸强碱可以有效杀死水霉。 盐分 主要存在于淡水，某些也常见于湿润的土壤中和半咸的河口水域，盐度高于2.8%的水域无水霉分布。4/10 000食盐和20mg/L～30 mg/L重铬酸钾可抑制菌丝生长和孢子萌发。培养基：用沸水处理过的大麻子仁、大麦粒、小麦粒、糯谷、鸡蛋黄、鱼卵、蛙卵、苍蝇、蟑螂、各种水生昆虫分别置盛有无菌水的培养皿中均可用作培养水霉等水生真菌的基质，为防止杂菌污染，可在无菌水中加入链霉素，使最终浓度为20µg～100µg/ml。用于纯培养的培养基有玉米粉琼脂（17g玉米粉与1000 ml水调匀，60～70℃加热2h，纱布过滤，在滤液中加15 g琼脂，溶化后补充水分，115℃高压灭菌30min。）和沙保劳培养基等。 1.3 病原性存在于一切淡水水域，国内外养殖地区都有流行。对水产动物无种类选择性，凡是受伤的均可感染，鲑科和鲤科鱼类、黄鳝、河鲈、鳗鲡、河蟹、鳖、蛙等等对水霉都具有易感性。水霉以腐生方式生活，水霉病属继发性感染，不能感染健康鱼体和正常的鱼卵，一般从鱼体的伤口入侵。在鱼类或其他动物的免疫力下降时（寄生虫、细菌、病毒感染）、搬运、拥挤、过高投饵率、水体中有机物含量高、或水温突然下降，会暴发水霉，是典型的机会性致病真菌。从鱼卵到各龄鱼。在密养的越冬池冬季和早春更易流行。死卵或未受精的卵容易着生水霉菌。虹鳟鱼卵孵化时间较长，遭受水霉病较严重。发病水温主要在18℃以下。 当鱼体表皮肤因理化因素，或细菌、病毒和寄生虫等生物因素感染受损伤时，水霉侵入损伤部位，向内外生长繁殖，入侵上皮及真皮组织，产生内菌丝，引起表皮组织坏死。有时可见到菌丝穿过肠壁入侵腹腔后感染肝脏、脾脏、心脏、鳔等内脏器官，引起病鱼死亡。向外生长的菌丝，形成肉眼可见的白色棉絮状物，俗称“白毛病”。由于寄生于体表的霉菌能分泌大量蛋白质分解酶，机体受刺激后分泌大量粘液，病鱼开始焦躁不安、食欲减退、游动无力，最后死亡。单性水霉可引起鲑科鱼类幼鱼的内脏真菌病，其最初侵入部位是胃的幽门部，随后菌丝在腹腔内大量生长繁殖。其主要原因可能是肠蠕动障得或肠道堵塞，饵料滞留胃内，导致孢子发芽或菌丝发育，寄生于胃壁而引起损伤，并向其它脏器扩散。 在鱼卵孵化过程中，鱼卵因溶氧低等引起发育停止或死亡时，亦可感染水霉，内菌丝入侵卵膜内，卵膜外长出大量外菌丝，产生“卵丝病”，俗称“太阳籽”。 皮肤或鳃上长出较肤浅，典型的水霉感染很少渗透过表皮肌肉层，棉花状物质，白毛病。 1.4 微生物学检查 1）肉眼观察和镜检 直接观察鱼体表有无棉毛状的菌丝体，即可作出初步诊断。内脏真菌病时，应取脏器病料制作压片后镜检。 2）分离培养 取病灶处组织，接种沙保劳等培养基后培养，镜检分离真菌的无性和有性生殖特点，可进一步确定病原体的种类。 1.5 防治 1）预防 注意避免鱼体受伤，改善饲养管理，增强鱼体抗病力。目前尚无防治水霉病的疫苗。但是用细菌疫苗免疫的网箱养殖草鱼，其水霉发生率很低，其机制尚不清楚。 2）治疗 用食盐和小苏打全池泼洒，使水中最终浓度分别为400mg/L。也可全池泼洒3mg/L～5 mg/L五倍子溶液。或用新法尔灭液全池泼洒，使药物在水体的浓度为5mg/L。 2、鳃霉病 Branchiomyces spp. 鳃霉属（Branchiomyces）是鲤科鱼类和其它淡水鱼类鳃霉病的病原。Grimaldi等人（1973）根据琼脂扩散试验结果，将其归属为水霉目。最近Liu K.C.et al对鳃霉的无性繁殖的超微结构观察，发现其动孢子囊内的动孢子具有两根鞭毛及动孢子囊形成情况，进一步将其列入水霉科中的鳃霉属。 2.1形态与繁殖特征 1）属的形态及繁殖特征 菌丝纤细、无横隔、有分支、弯曲，菌丝直径6µm-25µm，因部位不同而变化较大。动孢子囊与菌丝的粗细相当，菌丝内局部或全部均可形成孢子，孢子数量很多，成熟的动孢子呈球形，具两根等长的鞭毛，单行或多行在襄内排列。孢子是否具两游现象？有性生殖情况如何？尚无详细报道。 2）常见致病鳃霉的特征 从我国理科鱼类和其它淡水鱼类感染的鳃霉的菌丝形态结构和寄生情况来看，致病种类主要鳃霉 Branchiomyces spp （Branchiomyces sanguinis & Branchiomyces demigrans ）血鳃霉（B. sanguinis）：只寄生在鳃的血管内，不向鳃外生长。菌丝直而粗壮，分枝少，通常单枝蔓延生长，幼期菌丝粗短，分枝较多，直径多数为13.8µm ～20.7µm，有的达20µm～25µm，动孢子囊由菌丝局部形成，稍粗于菌丝直径，其大小、长短变动较大。动孢子较大，成熟的动孢子一般为圆形，着两根等长的鞭毛。孢子直径为7.4µm～9.6µm，平均8µm，细长的菌丝只形成单行的动孢子，粗的菌丝有2～3行或更多行的动孢子。我国已从草鱼、青鱼和鳗鲡鳃上分离此种鳃霉。 穿移鳃霉（B. demigrans）：菌丝纤细繁复，分枝特别多，常弯曲成网状分枝沿鳃血管伸展或从鳃组织向外生长，纵横交错，布满鳃丝和鳃小片。菌丝直径多为6.6µm～21.6µm。动孢子囊的形成，几乎占整个菌丝，属全菌丝产孢子方式，即在无性生殖期间生殖菌丝和营养菌丝没有区别。动孢子较小，直径为4.8µm～8.4µm。我国从青鱼、鳙、鲮和黄颡鱼鳃上观察到此种鳃霉。 2.2 病原性鳃霉属为寄生菌。草、青、鳙、鲮、黄颡鱼、银鲴等对鳃霉具有易感性，出现以鳃组织梗塞性坏死为特征的烂鳃病。其中鲮鱼苗最为易感，发病率高，死亡率达70%～90%。我国南方各省均有流行。国外报道，血鳃霉主要感染鲤科鱼类和丁鱼岁和鳗鲡等淡水鱼。穿移鳃霉主感染白斑狗鱼和丁鱼岁。该病主要发生于热天，流行高峰季节为5～10月份20℃以上），往往呈急性病，1-2 d内突然暴发，出现大量死亡，尤其在水质不良，池底老化，水中有机质突然增多的养殖池容易发生. 症状 急性型的病鱼，出现病情后几天内大量死亡，出现花鳃，呼吸困难，鳃上粘液增多。血栓形成和局部缺血组织学：有隔分枝菌丝，菌丝内有嗜伊红（苏木精－伊红染色）圆形体（不动孢子） Branchiomyces sanguinis 通常仅限于鳃血管。 Branchiomyces demigrans通常可穿过鳃丝血管壁进入内腔 2.3 微生物学检查取病鱼鳃组织压片，显微镜观察发现鳃丝内具粗大的分枝菌丝，且菌丝内有较多孢子即可诊断。 2.4 防治本病重在预防，尤其是防止从国外传入，我国将其列为进出境动物检疫的二类传染病。放鱼前清除池中过多淤泥，并用生石灰或漂白粉消毒。在疾病流行季节，定期灌注新水，保持水质清新，溶氧充足，养殖水温20℃以上。发病时应迅速清除死鱼，注入新水可减轻或控制病情。鱼醉菌病 病原霍氏鱼醉菌 Ichthyophonus hoferi [症状和病理变化] 专性病原菌，系统性真菌病，一旦侵入即难以医治。最常见于血管化器官，如心、脾、肾和肝。急性型：需要几星期发育，形成许多小白点，主要是由于真菌感染组织引起小的炎症反应。慢性型：强烈的、慢性炎症反应在不同器官呈白色或暗色结节；皮肤呈沙纸状或溃烂；欧洲虹鳟摇晃游动，侵入中枢神经系统。 流行情况该病是危害严重的真菌性疾病之一。欧洲、美洲和日本等地方养殖的虹鳟、鰤鱼、竹荚鱼等都曾由此病引起大批死亡。我国尚未报道有此病发生。可能是由于投喂被鱼醉菌感染的海水鱼碎屑所引起，是经口感染。传染的适宜水温在20℃以下和大降雨后，有较高的死亡率。防治方法主要是及时清除病鱼和死鱼，防治继续传染。不要用带菌鱼或病鱼作饲料。目前无治疗方法。 3、镰刀菌属(Fusarium) 在自然界广泛分布，种类很多，有些种类是人、动物和昆虫的病原菌；有些种类可侵染多种作物，引起病害；有些种类存在于粮食和饲料中，使其霉坏变质，产生多种对人和动物健康威胁极大的镰刀菌毒素，引发中毒；一些种类寄生于对虾和鱼类，是对虾、鱼类镰刀菌病的病原。 3.1形态及繁殖特征菌丝体比较直而少弯曲，具树叉状分枝，半透明，不具横隔，直径约2.2µm ～4.5µm。繁殖方法主要以形成分生孢子的方式进行，分为小分生孢子和大分生孢子。小分生孢子呈卵圆形或椭圆形，无横隔或有时有1个横隔，长4µm ～13µm。大分生孢子近镰刀形或新月形，有1～7个横隔，多数为3个横隔，长17µm～ 45µm。外界环境不良时，分生孢子还以厚垣孢子的形式出现，厚垣孢子通常位于菌丝的末端，少数在中间，呈圆形或椭圆形，有时四、五个连在一起，成串珠状。单个的直径约7µm ～12µm。镰刀菌的孢子形态见图12-。有些镰刀菌具有有性繁殖器官，即产生闭囊壳，其内含有子囊及8个子囊孢子。 虾类四种寄生性镰刀菌的形态特征比较 黄文芳等（1995年）报道，在大口黑鲈皮肤溃烂病灶上分离一株镰刀菌，经鉴定初步认为是一株镰状镰刀菌（F.fusarioides）。菌丝为分枝分隔多细胞菌丝，直径大小为2.3µm～ 5.2µm，具大型分生孢子，弯曲呈纺锤形或镰刀形。在气生菌丝的侧生单瓶状小梗上长出大分生孢子，少数长出两个大分生孢子；小型分生孢子呈椭圆形或棍棒形；厚垣孢子出现在菌丝中间或顶端，单生或串生，圆形或椭圆形，表面光滑。在PSA培养基上呈棉絮状菌丝，颜色从白色变为淡褐色，培养基的颜色从培养基本色变为黑褐色；在PDA培养基上，菌丝颜色从白色变为黄色，培养基的颜色变为黄褐色。在1%～6%NaCI浓度和pH值在6.4～9.86的范围中生长发育最好。 3.2 培养特性镰刀菌的生长适温为25℃， pH值在4～11范围均能生长，最适为pH5～10。最适NaCl浓度为0～5%，增加浓度有抑制作用，NaCl浓度达11%时完全不能发育。在Nycosrl琼脂（MA）平板上的菌落最初呈浅褐色，以后中央变为深褐色，边缘浅褐色，由于色素扩散，菌落周围及下部的培养基呈深褐色。菌落为圆形，平坦，中部稍隆起，出现白色棉絮状的气生菌丝。在老培养物中，气生菌丝常形成围绕中心的圆环，表面有白色细粉末，这是由于成熟的分生孢子从气生菌丝中产生的缘故。分生孢子对不良环境的抵抗力强，在无菌海水中，-5℃可存活150天，25℃存活300天，35℃存活180天，在室外自然干燥条件下存活140天。 3.3 病原性日本对虾、中国对虾、桃仁对虾、罗氏沼虾和龙虾对镰刀菌均具有易感性。镰刀菌主要寄生在鳃组织内，也寄生在附肢基部、体壁和眼球上。发病初期鳃、附肢、体表等部位出现浅黄色或桔红色斑块，随着病情发展，色斑变为浅褐色，鳃产生黑色素沉积，使鳃的外观呈点状或丝状黑色素条纹，严重时鳃呈黑色并发生溃烂，故称“黑鳃病”。病虾呼吸机能受阻，体色转暗，活力差，游动缓慢、反应迟钝、摄食减少、最后静卧池底而死亡。致死率高达90%以上。 流行情况镰刀菌是甲壳类的一种危害很大的病原。其宿主种类和分布地区都很广，在海水和淡水中都存在。各种对虾，美州龙虾及淡水的罗氏沼虾等也可受危害。但斑节对虾对它有抵抗力。国外报道主要是发生在养成的对虾上，我国则主要是发生在越冬的亲虾上，常并发细菌感染，可引起越冬亲虾大批死亡。 美国的加州对虾对此病最为敏感，感染率可高达100%，死亡率高达90％，其次为蓝对虾和万氏对虾。 镰刀菌为一种典型的机会致病茵，即对虾由于受伤、摩擦、受化学物质或其他生物的损害后，病原才趁机侵入。 3.4 微生物学检查 1)镜检 取病虾的鳃等病变组织制成水浸片，置于显微镜下观察，看到有大量的镰刀菌的菌丝和分生孢子。有时可见到分生孢子逸在鳃丝的顶端，呈花簇状排列。 2)分离培养 取病灶材料接种萨氏葡萄糖琼脂或加有双抗（青、链霉素）的其它普通真菌培养基，于适温下培养3～4d，可见到大或小的分生孢子，菌落机培养基可呈现特有的色素，根据大、小分生孢子的形态，分隔及产生的颜色等对镰刀菌的种类作出鉴定。 3.5 防治目前尚无理想治疗方法。主要是在早期进行预防，如池塘放养前用生石灰清塘。起捕、运输及日常管理时应细心操作，尽量避免虾体受到损伤。发病时，可试用三氯异氰尿酸全池泼洒，其最终浓度为0.3mg/L。 4、链壶菌属 （Lagenidium） 4.1形态及繁殖特征链壶菌菌丝分枝，一般不分隔，弯曲，直径7.5µm-40µm。菌丝成熟后，从菌丝上长出细长的排放管，排放管直线形，穿过虾、蟹外壳，伸到寄主体外，菌丝原生质流向末端而膨大，形成球形或椭圆形顶囊。在顶囊内形成许多具有2根鞭毛的游动孢子，成熟的游动孢子从顶囊逸出后，在水中游动一段时间，脱去鞭毛，形成休眠孢子，休眠孢子呈圆形，直径约10µm，当遇到寄主后，就发芽长出新的菌丝。动孢子放出后，顶囊消失。 离壶菌和海壶菌与链壶菌十分相似，其主要区别在于其游动孢子在菌丝体内形成，然后，通过排放管端开孔直接排放于水中，不形成顶囊。其次，海壶菌的动孢子发育成菌丝的过程中具有多次游动、多次休眠及单型性（多次动孢子的形状均相同）的特点。离壶菌的老菌丝的顶端会形成膨大的卵圆形构造，但不是顶囊。 4.2 生长特性链壶菌在5℃～35℃，含盐0%～6%，pH6 ～ 10时均可生长，适宜生长温度25℃～35℃，含盐0%～2%，pH值6～10。离壶菌也与此相似。海壶菌在2℃～35℃，含盐0%～10%，pH4～10时均可生长，适宜生长温度15℃～30℃，含盐0%～3%，pH值6～10。 4.3 病原性链壶菌等霉菌引起的链壶菌病在国内外均很常见，主要危害对虾、龙虾、蟹和贝类等的卵和幼体，尤以蚤状期和糠虾期最为严重。一旦感染发病，如不及时治疗，13天内可使全池幼体死亡。受感染的幼体游动不活泼，不摄食，趋光性差，身体逐渐变成灰白色，不透明，体质衰弱，不久便会死亡，死亡后的幼体体表也长出绒毛状的菌丝。被感染的卵，体积变小，不透明，在橘黄色的蟹卵团块上生病的卵呈褐色，在黑色或褐色的蟹卵团块上生病的卵呈浅灰色，受感染的卵粒不能孵化。幼虾和成虾可以带菌而不出现任何症状，从而构成传染源，造成本病发生与发展。 [症状] 寄生于虾卵和各级幼体，病虾因游泳力下降而沉底，24h内出现大量死亡，在病死的虾卵或幼虾内充满了菌丝。 4.4微生物学检查 1.用显微镜检查被感染的卵或幼体，在疾病早期就可观察到有大量分枝弯曲的菌丝寄生，严重时菌丝可穿出体表成绒毛状。病死后期菌丝充满组织，体表有成熟菌丝向体外伸出的排放管、顶囊等，即可作初步诊断。再根据菌丝形态、游动孢子形成方式、排放塔的形态和顶囊等区别病原种类。 2.用PYG琼脂（蛋白胨葡萄糖酵母膏琼脂）或其它类似的霉菌培养基从病体分离培养致病真菌。 4.5 防治 1.用漂白粉对沉淀池、鱼苗池进行彻底消毒。 2.由于链壶菌等致病霉菌在死的卵或幼体上高长率特别快，在有机质多的水中感染高，因此，应及时清除已死的幼体和卵，注意调节水质，加强饲养管理，经常检查产卵亲体，一旦发现本病，立即全池泼洒制霉菌素，使池水成60mg/L浓度，或遍洒亚甲基蓝，浓度为10～20mg/L。灰黄霉素（Griseofulvinum）口服的抑真菌抗菌药，对体表的各种癣菌有强大的抑菌，对其他的真菌和细菌无效。干扰真菌DNA合成。无杀菌作用。本品口服和外用对深、浅真菌病均有一定疗效。对淡水鱼、鱼卵、中华绒螯蟹、中华鳖的水霉病、鳃霉病均有防治作用。未见有耐药菌株出。本品对水霉、绵霉、鳃霉、鱼醉菌、丝囊霉菌、镰刀菌、链壶菌等有较好的抑制作用。用于防治水生动物的肤霉病、鳃霉病、虹鳟内脏真菌病、鱼醉菌病（虹鳟、红点鲑、各种热带鱼及师鱼）、乌鳢、香鱼流行性溃疡综合征、南美白对虾、南美白对虾、美洲龙虾和淡水的罗氏沼虾的镰刀菌病、长毛对虾、斑节对虾幼体的链壶菌病、鳖白毛病。 用法与用量口服 鱼类每日15-30 mg/kg体重，中华绒螯蟹、中华鳖每日20-40 mg/kg体重，分2次投喂，连用3-6d. 浸浴 用灰黄霉素与1％食盐和碳酸氢钠（小苏打）合剂（1:1）配成8 mg/L浓度的溶液浸浴鱼和鱼卵10 min左右。休药期 500度日 克霉唑（clotrinazolum）别名 三苯甲咪唑，抗真菌一号，氯典马唑，氯三苯甲咪唑，Canesten， Canifug， Chlortritylimidazole， Clotrimazole， Empecid等。本品为可内服广谱抗真菌药，对多种病原性真菌都有抑制作用。该药性小，内服易吸收，但仅为抑菌药，停药过早易引起复发。本品口服和外用对深、浅真菌病均有一定疗效。本品对水霉、绵霉、鳃霉、鱼醉菌、丝囊霉菌、镰刀菌、链壶菌等有较好的抑制作用。用于防治水生动物全身性和深部真菌性感染。本品对淡水鱼、鱼卵、鲟鱼、中华绒螯蟹、中华鳖的水霉病、鳃霉病、虹鳟内脏真菌病、鱼醉菌病（虹鳟、红点鲑、各种热带鱼及师鱼）、乌鳢、香鱼流行性溃疡综合征、南美白对虾、南美白对虾、美洲龙虾和淡水的罗氏沼虾的镰刀菌病、长毛对虾、斑节对虾幼体的链壶菌病均有明显的作用。 用法与用量口服 鱼类每日15-30mg/kg体重，中华绒螯蟹、中华鳖每日20-40mg/kg体重，分2次投喂，连用3-6d. 浸浴 用克霉唑与1％食盐和碳酸氢钠（小苏打）合剂（1:1）配成8 mg/L浓度的溶液浸浴鱼和鱼卵10 min左右。休药期 500度日
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