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简介
这是一个关于蚕豆病PPT素材课件，这个ppt包含了蚕豆病简介，易发人群，临床表现，实验器材和试剂，实验操作流程，注意事项，结果分析，说明，实验室检查，基因结构分析法等内容。蚕豆病是一种6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6-PD）缺乏所导致的疾病，表现为在遗传性葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）缺陷的情况下，食用新鲜蚕豆后突然发生的急性血管内溶血。早期有恶寒、微热、头昏、倦怠无力、食欲缺乏、腹痛，继之出现黄疸、贫血、血红蛋白尿，尿呈酱油色，此后体温升高，倦怠乏力加重，可持续3日左右。与溶血性贫血出现的同时，出现呕吐、腹泻和腹痛加剧，肝脏肿大，肝功能异常，约50%患者脾大。严重病例可见昏迷、惊厥和急性肾衰竭，若急救不及时常于1～2日内死亡。更多内容，欢迎点击下载蚕豆病PPT素材课件哦。
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2010级本科分子生物学实验设计
一、根据上述患儿的临床表现和实验室检查，初步判断患儿是何种疾病
蚕豆病
蚕豆病简介
蚕豆病是一种6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6-PD）缺乏所导致的疾病，表现为在遗传性葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）缺陷的情况下，食用新鲜蚕豆后突然发生的急性血管内溶血。
临床表现
早期有恶寒、微热、头昏、倦怠无力、食欲缺乏、腹痛，继之出现黄疸、贫血、血红蛋白尿，尿呈酱油色，此后体温升高，倦怠乏力加重，可持续3日左右。与溶血性贫血出现的同时，出现呕吐、腹泻和腹痛加剧，肝脏肿大，肝功能异常，约50%患者脾大。严重病例可见昏迷、惊厥和急性肾衰竭，若急救不及时常于1～2日内死亡。
二、设计实验进一步明确诊断
红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性测定（紫外法）
（一）实验器材和试剂
1.实验器材
恒温水循环紫外分光光度计，可见分光光度计，离心机。
2.试剂
（1）0.5mol/L Tris-HCl MgCl2缓冲溶液（pH8.0）：称取Tris12.1g，MgCl2·6H2O 4.06g，加入160mL蒸馏水溶解，用HCl调pH至8.0，然后加入蒸馏水至200mL。
（2）2 mmol/L烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP＋)：称取NADP＋ 21.3mg，溶于10mL蒸馏水中。4 ℃可保存20天左右。
（3）6mmol/L葡萄糖—6—磷酸二钠(G6P－Na2)：称取21.5mg G6P－Na2·2H2O，溶于10mL蒸馏水中。4 ℃可保存20天左右。
（4）溶血剂：取巯基乙醇0.1mL，10% EDTA 2.0mL，6mmol/L NADP＋ 0.4mL，加蒸馏水至总体积200mL。
（5）血红蛋白氧化剂（Drabkin试剂）：称取K3Fe(CN)6 0.2g，KCN 0.052g，NaHCO3 1.0g，加蒸馏水至1000mL，置棕色瓶内避光保存，可保存20天。
（6）0.9% NaCl，ACD抗凝剂。
（二）实验操作流程
（三）注意事项
1.洗涤红细胞时禁止剧烈震荡，避免溶血。
2.测定NADPH时读取吸光度的时间要准确。
（四）结果分析
1.NADPH产量的计算 NADPH在340nm处，其每微摩尔的吸光系数（ε）为6.220，故10min内NADPH的产量计算公式为：
NADPH产量（μmol）=
2.血红蛋白含量的计算 血红蛋白氧化为高铁血红蛋白以后，在540nm处，其毫摩尔吸光细数（ε）为44，故溶血液中血红蛋白的含量计算公式为：
血红蛋白含量（mmol）=
3.G6PD比活性（U/g Hb）的计算
G6PD比活性单位（U/g Hb）
=
=
三、从生化代谢解释患儿的临床表现和实验室检查结果
红细胞膜的破坏
胆色素代谢异常
红细胞膜的破坏
葡萄糖磷酸戊糖途径
红细胞膜的破坏
还原型谷胱甘肽
体内重要的抗氧化剂
保护红细胞膜蛋白的完整性
说明
17——20为一个版本
22——31为另一个版本
参考一下看哪个你比较容易理解然后就用哪个
实验室检查
黄疸
皮肤，巩膜及黏膜等组织黄染
恶心，呕吐
全身无力
面色苍白
四、要想探讨该病发生的分子基础，可以用哪些技术检测什么目的基因？（选答）
基因结构分析法
我组讨论认为：要想探讨该病发生的分子基础 ，需要对目的基因进行基因结构分析，即DNA序列检测
双脱氧末端终止法（Sanger法）
Sanger法是根据双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)在DNA合成过程中不能形成3’，5’-磷酸二酯键而导致链延伸终止的原理，利用四种ddNTP代替部分脱氧核苷酸（dNTP）作为底物进行DNA合成，从而获得在不同部位终止反应的大小不同的DNA链，结合高分辨率变性聚丙烯凝胶电泳分离，就可以对DNA序列进行分析。
五、患者体型瘦小与该病症是否有关，为什么？（选答）
患者体型瘦小与该病症有关
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