病毒分子生物学ppt

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HPV病毒的分子生物学 探究 杨永强 目录 一、高、中、低危型HPV 二、HPV检测在临床各阶段中的意义 三、HPV的检测 什么是HPV? HPV的分型 目前研究中, 与人类癌症存在相关性的病毒包括: 目前真正通过体外病理模型确认的只有HPV16,可导致宫颈癌。 并且在HPV这一病毒种属中真正致癌的具体病毒型别仍尚待研究,已确认的致癌型别有,HPV16,18,31,45. (其中HPV16经体外病理模型证实,HPV18,45,31经流行病学证实。) HPV的分型 高危型HPV 中危型HPV 低危型HPV ★高、中、低危型不是依据其致癌性划分,而是依据其致癌的可能性划分的。 所以说,高危型不代表是致癌型,只是表示其致癌的危险性高。 人们最早发现的HPV型别是HPV6(Gissmann and zur Hausen,1980)和HPV11 (Gissmann et al.,1982) ,但它们并不能导致宫颈癌。 在研究HPV6和HPV11的致癌性过程中,才发现了真正的宫颈癌元凶HPV16 (Dürst et al.,1983)、HPV18 (Boshart et al.,1984) 。 HPV的致癌性研究 致癌因子可能包含所有的高危型HPV,但并不是所有的高危型HPV都已被确认为有必然的致癌性。 目前确认的是HPV16、18、31、45。 高危型HPV病毒致病机理 —L1、L2 、E6、E7基因的功能 HPV检测在临床各阶段中的意义 检测对象:宫颈分泌物中的脱落细胞 分泌物检测的规范化 —内标的意义 现在已经世界卫生组织采用和确认的标准为 β-globin gene(β-球蛋白基因) β-球蛋白基因(β-globin gene)是一种存在于上皮细胞中的管家基因,可作为宫颈上皮细胞的身份证,它的存在标志着临床所取标本中一定含有宫颈上皮细胞,从而规范地避免了因临床取样未获得足够的(针对分子生物学实验)宫颈上皮细胞而导致实验结果的假阴性问题。 HPV检测在临床各阶段中的意义 分型的同时定量 而但由于取样等因素导致取到可检测的宫颈脱落细胞不同,相应的病毒载量完全无可比性。而当我们引入内标后,通过相对定量值和内标值之间的换算,可得到该患者病毒载量的绝对定量值,甲为2×103拷贝数,乙为2×106拷贝数。 此时我们可得到准确的结果提示:乙患者感染HPV16型病毒载量远远高于甲,且乙患宫颈癌的风险属高度。 双色荧光,一管检测多个型别 每个标本用3次实时平行扩增反应,通过两种荧光基团对八种高危型HPV进行检测。 基因分型: 主要高危型: HPV16,18, 45, 31. (建议对阳性患者进行下一步的检查,如: TCT,阴道镜,或病理活检) 次要高危型: HPV33,52,58,67. (建议关注阳性患者的病毒量) 一种即高效又实用的临床检测方法 不仅分型,而且定量 双荧光图 深圳市医学会检验医学专业委员会第十届年会 暨 第四届深港澳检验医学学术研讨会 圆满成功!Kwk红软基地

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