淀粉的检测ppt

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这是淀粉的检测ppt,包括了酸水解法,酶水解法,旋光法,酶—比色法,样品经乙醚除去脂肪,乙醇除去可溶性糖类后,用酸水解淀粉为葡萄糖,按还原糖测定葡萄糖含量,再把葡萄糖折算为淀粉含量等内容,欢迎点击下载。

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淀粉总量的测定 淀粉总量的测定 酸水解法 酶水解法 旋光法 酶—比色法 酸水解法 原理 样品经乙醚除去脂肪,乙醇除去可溶性糖类后,用酸水解淀粉为葡萄糖,按还原糖测定葡萄糖含量,再把葡萄糖折算为淀粉含量。换算系数为162/180=0.9。 酸水解法 试剂 6mol/L盐酸溶液 20%氢氧化钠溶液 0.2%甲基红乙醇溶液(称取0.1g甲基红,用60%乙醇溶解并定容到100mL) 酸水解法 操作方法 (1)样品处理 较干燥、易研细的样品:称取2-5g(含淀粉0.5g左右)磨碎、过40目筛的样品,用30mL乙醚分3次洗去样品中的脂肪,再用150mL85%乙醇分数次洗涤残渣以除去可溶性糖类。 酸水解法 水分较多又不易研细、分散的样品: 先按1:1加水在组织捣碎机中到成绩匀浆。称取5-10g(含淀粉0.5g左右)匀浆用30mL乙醚振荡提取脂肪,洗去样品中的脂肪,再用30mL乙醚分2次洗涤过滤后的残渣,然后以150mL85%乙醇分数次洗涤残渣以除去可溶性糖类。 酸水解法 (2)水解 将残渣用100mL的水溶解,并加入30mL 6mol/L盐酸,回流2h,再用流动水冷却。加入甲基红指示剂溶剂,用40%NaOH溶液和6mol/L盐酸将样品水解液调为中和。然后加入20mL 20%中性醋酸铅溶液,沉淀蛋白质、果胶等杂质,再加入20mL 10%NaSO4溶液以除去过多的铅。 酸水解法 空白试验 (3)测定 按还原糖测定法中的直接滴定法或高锰酸钾法进行。 酸水解法 计算结果 (1)高锰酸钾法 酸水解法 (2)直接滴定法 酶水解法 原理 样品经除去脂肪和可溶性糖类后,在淀粉酶的作用下,使淀粉水解为麦芽糖和低分子糊精,再用盐酸进一步水解为葡萄糖,然后按还原糖测定其他还原糖含量,并折算成淀粉含量。计算公式同酸水解法。 酶水解法 (1)样品处理: 称取2-5克样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50毫升乙醚分5次洗除脂肪,再用约100毫升85%乙醇洗去可溶性糖类,将残留物移入250毫升烧杯内,并用50毫升水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15分钟,使淀粉糊化,放冷至60℃以下,加20毫升淀粉酶溶液,在55-60℃保温1小时,并时时搅拌。然后取1滴此液加1滴溶液,应不显现蓝色,若显蓝色,再加热糊化并加20毫升淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显蓝色为止。加热至沸,冷后移入250毫升容量瓶中,并加水至刻度,混匀,过滤,弃去初滤液。取50毫升滤液,置于250毫升锥形瓶中,并加水至刻度,沸水浴中回流1小时,冷后加2滴甲基红指示液,用20%氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100毫升容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并人100毫升容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。 酶水解法 (2)测定: 吸取50毫升处理后的样品溶液,于400毫升烧杯内,加入25毫升碱性酒石酸铜甲液及25毫升乙液,于烧杯上盖一表面皿,加热,控制,在4分钟内沸腾,再准确煮沸2分钟,趁热用铺好石棉的古氏坩埚或c4垂融坩埚抽滤,并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀,至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400毫升烧杯中,加25毫升硫酸铁溶液及25毫升水,用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解,以0.1000N高锰酸钾标准溶液滴定至微红色为终点。 同时量取50毫升水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液,按同一方法做试剂空白实验。 旋光法 原理 淀粉具有旋光性,再一定条件下旋光度的大小与淀粉的浓度成正比。用CaCl2溶液提取淀粉,使之与其他成分分离,用SnCl2沉淀提取液中的蛋白质后,测定旋光度,即可计算出淀粉含量。 旋光法 计算公式 旋光法 仪器 旋光法 酶—比色法 酶—比色法 计算公式zGC红软基地

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