截图
简介
这是琼脂糖凝胶电泳ppt，包括了目的要求，电泳的概念，琼脂糖凝胶电泳的原理，琼脂糖凝胶电泳的应用，影响电泳泳动率的四大因素，核酸电泳的指示剂等内容，欢迎点击下载。
琼脂糖凝胶电泳ppt是由红软PPT免费下载网推荐的一款课件PPT类型的PowerPoint.
分子生物学实验 Experiments of molecular biology 实验四 琼脂糖凝胶电泳 一 .电泳的概念 琼脂糖凝胶电泳的原理 琼脂糖凝胶电泳的应用 影响电泳泳动率的四大因素 2、 琼脂糖浓度 一个给定大小的线状DNA分子，其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。分离小于0.5kb的DNA片段所需胶浓度是1.2-1.5%，分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%， DNA片段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.8-1.0%。 3、 电源电压 在低电压时，线状DNA片段的迁移速率与所加电压成正比。但是随着电场强度的增加，不同分子量的DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长，片段越大，因场强升高引起的迁移率升高幅度也越大，因此电压增加，琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段的分辨率达到最大，所加电压不得超过5v/cm。 4、嵌入染料的存在 荧光染料溴化乙啶用于检测琼脂糖凝胶中的DNA，染料会嵌入到堆积的碱基对之间并拉长线状和带缺口的环状DNA，使其刚性更强，还会使线状DNA迁移率降低15％。 5、 离子强度影响 电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的电泳迁移率。在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶)，电导率最小，DNA几乎不移动，在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液)，则电导很高并明显产热，严重时会引起凝胶熔化或DNA变性。 对于天然的双链DNA，常用的几种电泳缓冲液有TAE[含EDTA (pH8.0)和Tris-乙酸]，TBE(Tris-硼酸和EDTA)，TPE(Tris-磷酸和EDTA)，一般配制成浓缩母液，储于室温。 核酸电泳的指示剂 琼脂糖凝胶电泳的基本步骤 和注意事项
展开
